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《辅酶A》

出处: 西药部颁 第9册
拼音名:FUmei A
英文名:COENZYMUM A
书页号:S1-37
标准编号:WS1-C3-0026-89
[C21H36N7O16P3S=767.54]
本品按干燥品计算,每1mg含辅酶A-SH的效价不得少于220单位。
【性状】 本品为白色或微黄色粉末,有类似蒜的臭气,有引湿性。
本品在水或生理盐水中易溶,在乙醇、乙醚或丙酮中不溶。
【鉴别】 取本品,加水制成每1ml中含辅酶A约10单位的溶液,照分光光度法测定(中国药典1985年版二部附录20页),在258±1nm的波长处有最大吸收,在230±1nm的波长处有最小吸收。
【检查】 干燥失重 取本品,置五氧化二磷干燥器中,减压干燥至恒重,减失重量不得过5.0%(中国药典1985年版二部附录40页)。
热原 取本品,加注射用水制成每1ml中含辅酶A5单位的溶液,依法检查(中国药典1985年版二部附录86页),剂量按家兔体重每1kg注射1ml,应符合规定。
【效价测定】 供试品溶液的制备 精密称取辅酶A适量,加水制成每1ml中含1mg的溶液。
测定法 取三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液(pH7.6)3.0ml,置1cm石英池中,加乙酰磷酸二锂盐液(0.1mol/L)0.1ml,再精密加入供试品溶液0.1ml,混匀,照分光光度法(中国药典1985年版二部附录20页),在233nm的波长处测定吸收度为E;用微量注射器精密加入磷酸转乙酰化酶溶液0.01ml,混匀,在3~5分钟内测定最高的吸收度为E<[1]>;再加入磷酸转乙酰化酶溶液0.01ml,混匀,测定吸收度为E<[2]>。另取三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液(pH7.6)3.0ml、乙酰磷酸二锂盐液(0.1mol/L)0.1ml及供试品溶液0.1ml,置1cm石英池中,混匀后,作为空白。
按下式计算:
每毫升(毫克)含辅酶A-SH的单位数=△E×5.55×413 △E=2E<[1]>-E<[0]>-E<[2]>
【作用与用途】 辅酶类。用于白细胞减少症、原发性血小板减少性紫癜及功能性低热等。
【贮藏】 密封、遮光、在阴凉处保存。
【制剂】 注射用辅酶A
──────────────────────────────────────
三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液(0.1mol/L,pH7.6) 取三羟甲基氨基甲烷12.1g,加水500ml使溶解,用盐酸液(1mol/L)约70ml调节pH至7.6,再用水稀释至1,000ml。
三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液(0.1mol/L,pH8.0) 照上法配制,将pH值调至8.0。
乙酰磷酸二锂盐液(0.1mol/L) 取乙酰磷酸二锂盐91.2mg,加水溶解并稀释至6.0ml,必要时滤过。
磷酸转乙酰化酶溶液 取磷酸转乙酰化酶适量,用三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液(pH8.0)制成每1ml中含30~40单位的溶液,必要时离心,分取上清液。临用时配制。 更多:https://www.bmcx.com/
△E×V<[1]>
效价测定公式 每毫升(毫克)含辅酶A-SH的单位数=──────────────
△ε×1×V<[2]>×0.767×413
=△E×5.55×413
△E=E<[1]>-E<[0]>-△E<[PTA]>=2E<[1]>-E<[0]>-E<[2]>
△E<[PTA]>=E<[2]>-E<[1]>
V<[1]>=测定液的总体积(3.12ml)
V<[2]>=供试品溶液的体积(0.1ml)
1=光路长度(1cm)
△ε=在233nm处辅酶A-SH和乙酰辅酸A之间的消光系数之差4.44cm<2>/μmol
0.767=1μmol的辅酶A-SH=0.767mg
413=纯辅酶A-SH为413μ/mg
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