拼音名：Jisuihuizhiyan Jiandu Huoyimiao Tangwan (Houshen Xibao)
英文名：Poliomyelitis Vaccine in Dragee Candy (Monkey Kidney Cell)，LiVe 书页号：2005年版三部－132 本品系用脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型减毒株分别接种于原代猴肾细胞，经培养、收获病毒液后制成糖丸。用于预防脊髓灰质炎。 1 基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。 2 制造 2.1 生产用细胞 生产用细胞为原代猴肾细胞。 2.1.1 细胞管理及检定 应符合“生物制品生产用动物细胞基质制备及检定规程”规定。 生产用猴肾细胞应选自未做过其他试验的健康猕猴，所用动物必须经不少于6周的隔离检疫，应无结核、B病毒感染及其他急性传染病，血清中泡沫病毒抗体应为阴性。凡有严重化脓灶、赘生物以及明显的肝、肾病理改变者不得使用。 2.1.2 细胞制备 取符合2.1.1项要求的健康猕猴肾脏，经胰蛋白酶消化、分散细胞，置37.0℃±0.5℃培养6～9天长成单层。每只猕猴制备的细胞为一个细胞批。 2.2 毒种 2.2.1 名称及来源 生产用毒种为脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型减毒株；可用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin纯化株，中Ⅲ2株或经批准的其他毒株。 2.2.2 种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”规定。 2.2.2.1 原始种子批 Sabin株原始毒种Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型及中Ⅲ2株均由毒种研制单位制备和保存。 2.2.2.2 主种子批 由原始毒种在胎猴肾细胞或人二倍体细胞上传1～2代制成的成分均一的一批病毒悬液称为主种子批。 Sabin株主种子批的传代水平为SO+1；中Ⅲ2株主种子批传代水平为中Ⅲ2 1代；Ⅲ型pfizer株主种子批为RSO 1。 2.2.2.3 工作种子批 主种子批毒种在胎猴肾细胞或人二倍体细胞上传1代制备成的成分均一的一批病毒悬液称为工作种子批。 2.2.3 毒种传代 从原始种子批到工作种子批的传代次数，SabinⅠ型、SabinⅡ型和其他纯化株以及中Ⅲ2株不得超过3代；SabinⅢ型及其他纯化株包括pfizer株不得超过2代。 制备生产用种子批所用的细胞应限于胎猴肾细胞或人二倍体细胞。 2.2.4 种子批毒种的检定 除另有规定外，主种子批及工作种子批应进行以下全面检定。 2.2.4.1 鉴别试验 取适量Ⅰ型、Ⅱ型或Ⅲ型单价脊髓灰质炎病毒抗血清与适量病毒液混合，置35～37℃中和1～2小时，接种猴肾细胞、Hep-2细胞或其他敏感细胞，置适宜温度(35～36℃)培养，7天判定结果，病毒型别应准确无误。同时设血清和细胞对照，均应为阴性。病毒对照应为阳性。 2.2.4.2 病毒滴定 采用微量细胞病变法。取毒种做10倍系列稀释，每稀释度病毒液接种猴肾细胞、Hep-2细胞或其他敏感细胞，置适宜温度(35～36℃)培养，7天判定结果。病毒滴度均应不低于6.5 lg CCID50/ml。应同时进行病毒参考品滴定。 2.2.4.3 无菌检查 依法检查(附录Ⅻ A)，应符合规定。 2.2.4.4 支原体检查 依法检查(附录Ⅻ B)，应符合规定。 2.2.4.5 病毒外源因子检查 依法检查(附录Ⅻ C)，应符合规定。 2.2.4.6 家兔检查 毒种应进行此项检查，如不立即进行试验，毒种应保存于－20℃以下。取体重为1.5～2.5kg的健康家兔至少5只，每只注射10ml，用其中1.0ml皮内多处注射，其余皮下注射，观察3周。到期存活动物数应不低于80%，无B病毒和其他病毒感染判为合格。家兔在24小时以后死亡，疑有B病毒感染者应尸检，须留神经组织和脏器标本待查，用脑组织做10%悬液，用同样方法接种5只健康家兔进行检查。 2.2.4.7 免疫原性检查 用主种子批毒种制成原疫苗，按常规接种易感儿童(免疫前抗体效价<1：4)至少30名，分别于免疫前及免疫后4周采血，测定中和抗体，免疫后抗体阳转率应不低于95%。 2.2.4.8 猴体神经毒力试验 依法检查(附录Ⅺ L)，应符合规定。 2.2.4.9 rct特征试验 将单价病毒液分别于36℃±0.1℃及40℃±0.1℃进行病毒滴定，试验设t-对照(生产毒种或已知对人安全的疫苗)。如果病毒液和t-对照在36℃±0.1℃的病毒滴度与40℃±0.1℃的滴度差不低于5.0 lg，则rct特征试验合格。 2.2.4.10 SV40核酸序列检查 依法检查(附录Ⅸ H)，应为阴性。 2.2.5 毒种保存 液体毒种需加终浓度为1mol/L的氯化镁溶液，置－60℃以下保存。 2.3 原液 2.3.1 细胞制备 同2.1.2项。 2.3.2 培养液 培养液为含适量灭能小牛血清和乳蛋白水解物的Earle※s液或其他适宜培养液。小牛血清的质量应符合要求(附录Ⅻ D)。培养病毒的维持液为不含小牛血清和乳蛋白水解物的Earle※s液或其他适宜的维持液。 2.3.3 对照细胞病毒外源因子检查 依法检查(附录Ⅻ C)，应符合规定。 2.3.4 病毒接种和培养 毒种与细胞按一定比例接种，种毒后置33℃±0.5℃培养40～96小时至细胞出现完全病变后收获。 2.3.5 病毒收获 病毒液经澄清过滤合并后即为单价原液。 2.3.6 原液合并或浓缩 单价原液可进行合并或浓缩。 2.3.7 单价原液检定 按3.1项进行。 2.4 半成品 2.4.1 配制 单价病毒原液加入氯化镁，终浓度为1mol/L，即为单价疫苗半成品。取适量Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型单价疫苗半成品，按一定比例进行配制，即为三价疫苗半成品。 2.4.2 半成品检定 按3.2项进行。 2.5 成品 2.5.1 疫苗糖丸制备 三价疫苗半成品及赋形剂按一定比例混合制成糖丸。滚制糖丸时，操作室内温度应在18℃以下。 2.5.2 分批 应符合“生物制品分批规程”规定。同一次混合的三价疫苗半成品制备的糖丸为一批，非同容器滚制的糖丸分为不同亚批。 2.5.3 分装 应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。 2.5.4 规格 每粒1g。每1次人用剂量为1粒，含脊髓灰质炎活病毒总量应不低于5.95 lg CCID50，其中Ⅰ型应不低于5.8 lg CCID50，Ⅱ型应不低于4.8 lg CCID50，Ⅲ型应不低于5.3 lg CCID50。 2.5.5 包装 应符合“生物制品包装规程”规定。 3 检定 3.1 原液检定 3.1.1 鉴别试验 按2.2.4.1项进行 3.1.2 病毒滴定 按2.2.4.2项进行。病毒滴度均应不低于6.5 lg CCID50/ml。 3.1.3 猴体神经毒力试验 依法检查(附录Ⅺ L)，应符合规定。 3.1.4 SV40核酸序列检查 依法检查(附录Ⅸ H)，结果应为阴性。 3.1.5 无菌检查 依法检查(附录Ⅻ A)，应符合规定。 3.1.6 支原体检查 ‘ 依法检查(附录Ⅻ B)，应符合规定。 3.2 半成品检定 3.2.1 病毒滴定 按2.2.4.2项进行。单价疫苗半成品病毒滴度应不低于6.5 lg CCID50/ml。三价疫苗半成品病毒滴度应不低于7.15 lg CCID50/ml，其中Ⅰ型应不低于7.0 lg CCID/ml，Ⅱ型应不低于6.0 lg CCID50/ml，Ⅲ型应不低于6.5 lg CCID50/ml。 3.2.2 无菌检查 依法检查(附录Ⅻ A)，应符合规定。 3.3 成品检定 每个糖丸滚制容器取200～300粒。 3.3.1 鉴别试验 取适量Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型三价混合脊髓灰质炎病毒抗血清与适量病毒供试品混合，置35～37℃中和1～2小时，接种Hep-2细胞或其他敏感细胞，置适宜温度(35～36℃)培养，7天判定结果，应无病变出现。同时设血清和细胞对照，均应为阴性。病毒对照应为阳性。 3.3.2 外观 应为白色固体糖丸。 3.3.3 丸重差异 取糖丸20粒测定，每1粒重量为1g±0.15g。 3.3.4 病毒滴定 每3～4亚批合并为1个检定批，取100粒糖丸，加Earle※s液至1000ml，即为1：10稀释度，取适宜的稀释度用病变法进行病毒滴定。 三价疫苗糖丸以混合法测定病毒含量，同时应以中和法检测各型病毒含量。采用中和法需预先精确测定异型抗体的交叉抑制值，以校正滴定结果。按2.2.4.2项测定病毒滴度，每剂三价疫苗糖丸病毒总量应不低于5.95 lg CCID50，其中Ⅰ型应不低于5.8 lg CCID50，Ⅱ型应不低于4.8 lg CCID50，Ⅲ型应不低于5.3 lg CCID50。 3.3.5 热稳定性试验 疫苗出厂前应进行热稳定性试验，应与病毒滴定同时进行。37℃放置48小时后，按2.2.4.2项进行病毒滴定，病毒滴度应不低于5.0 lg CCID50，病毒滴度下降应不高于1.0 lg。 3.3.6 病毒分布均匀度 每批抽查糖丸10粒以上，测定疫苗糖丸的病毒分布均匀度。逐粒滴定病毒含量，各粒之间的病毒含量差不得超过0.5 lg。 3.3.7 杂菌数检查 同一天滚制的糖丸为1个供试品，每个糖丸滚制容器中取样不得少于10粒，每粒杂菌数不得超过300个。 3.3.8 致病菌检查 不得含有乙型溶血性链球菌、肠道致病菌以及大肠杆菌。 3.3.8.1 乙型溶血性链球菌检查 取10倍稀释的本品0.5ml，接种肉汤培养基1支，37℃培养24小时，再用划线法移种血平皿1个，37℃培养24小时，应无乙型溶血性链球菌生长(如原料、辅料已做过此项检查并合格，成品可不再做)。 3.3.8.2 肠道致病菌检查 取10倍稀释的本品1.0ml，接种GN或肉汤增菌培养基1管，37℃培养，于6～24小时内用划线法转种鉴别培养基平皿1个，37℃培养24小时，如有革兰阴性杆菌，应进一步鉴定是否为肠道致病菌。 3.3.8.3 大肠杆菌检查 取经10倍稀释的本品接种普通克斯列或麦康凯肉汤培养基3管，每管2ml，37℃培养48小时，不应有产酸、产气现象。如有产酸、产气现象，应进一步鉴别是否为大肠杆菌。 4 保存、运输及有效期 自病毒滴度检定合格之日起，于－20℃以下保存，有效期为2年；于2～8℃保存，有效期为5个月。运输应在冷藏条件下进行。标签上只能规定一种保存温度及有效期。 5 使用说明 脊髓灰质炎减毒活疫苗糖丸(猴肾细胞) 使用说明
【药品名称】 通用名称：脊髓灰质炎减毒活疫苗糖丸(猴肾细胞) 英文名称：Poliomyelitis Vaccine in Dragee Candy (Monkey Kidney Cell)，Live 汉语拼音：Jisuihuizhiyan Jiandu Huoyimiao Tangwan (Houshen Xibao)
【成分和性状】 本品系用脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型减毒株分别接种于原代猴肾细胞，经培养、收获病毒液后制成。为白色固体糖丸。
【接种对象】 主要为2个月龄以上的儿童。
【作用与用途】 本疫苗服用后，可刺激机体产生抗脊髓灰质炎病毒免疫力。用于预防脊髓灰质炎。
【规格】 每粒糖丸重1g。每1次人用剂量为1粒，含脊髓灰质炎活病毒总量应不低于5.95 lg CCID50，其中Ⅰ型应不低于5.8 lg CCID50，Ⅱ型应不低于4.8 lg CCID50，Ⅲ型应不低于5.3 lg CCID50。
【用法用量】 基础免疫为3次，首次免疫从2月龄开始，连续口服3次，每次间隔4～6周，4岁再加强免疫1次，每1次人用剂量为1粒。其他年龄组在需要时也可以服用。 更多：https://www.bmcx.com/
【不良反应】 口服后一般无副反应，个别人有发热、恶心、呕吐、腹泻和皮疹。一般不需特殊处理，必要时可对症治疗。
【禁忌】 (1) 发热、患急性传染病者。 (2) 患免疫缺陷症、接受免疫抑制剂治疗者。 (3) 妊娠期妇女。
【注意事项】 本品系活疫苗，应使用37℃以下的温水送服，切勿用热水送服。
【贮藏】 －20℃以下或2～8℃避光保存和运输。
【包装】
【有效期】 －20℃以下有效期为2年；2～8℃有效期为5个月。(标签只能规定一种保存温度及有效期。)
【执行标准】
【批准文号】
【生产企业】 企业名称： 生产地址： 邮政编码： 电话号码： 传真号码： 网 址：